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凯氏方法测定肝脏中蛋白质的含量

2022.07.27

动物肝脏具有非常高的蛋白质，尤其是猪、牛、羊，也是人们餐桌上的美食。蛋白质是一切生命的物质基础，是机体细胞的重要组成部分，是人体组织更新和修补的主要原料。蛋白质是构成人体必需的催化和调节功能的各种酶，具有催化、促进食物的消化吸收利用的作用。动物蛋白摄入过量可能会导致骨质疏松症。因为多数动物蛋白质都是酸性的，需要在体内中和。这些酸在骨骼中被缓冲，最终导致骨骼中的钙发生流失，从而引发潜在的骨质疏松症。此外，令人担忧的是长期高蛋白质摄入可能会增加肾脏的负担，导致肾脏出现病变。对此专家们也是各持己见，有些专家建议每天摄入120克蛋白质，另一些专家则建议每天每公斤体重摄入1.5~2克蛋白质。

通过N310凯氏定氮仪测定肝脏中蛋白质含量，自动化操作，节省人力物力。

一、仪器

凯氏定氮仪（N310，格丹纳）

二、试剂
硫酸钾K₂SO₄、五水硫酸铜、浓硫酸、双氧水

三、操作部分
1、称取肝脏2g样品，精度为0.1mg，样品均匀，放在消化管内，然后加入7g硫酸钾K₂SO₄、0.8g五水硫酸铜、12ml浓硫酸H2SO4（98%）轻轻摇晃消化管，将其混匀，如果样品脂肪含量高，则需要用15ml浓硫酸，5ml双氧水。

2、消解仪设定好程序，启动开始415度开始消化45分钟，将消化管冷却到50~60℃。

3、将消化管放在蒸馏室的位置上,通过控制面板设定好定氮方法，按开始键进行工作，定氮仪自动加酸，自动加碱，自动蒸馏，自动淋洗，实验中的参数如下：
稀释水=75ml
H₃BO₃=30ml
NaOH=50ml
凯氏定氮仪是采用手动滴定，滴定液：HCl 0.2mol/L，滴定出结果。

N310凯氏定氮仪具有蒸汽温度监控，保证各样品的蒸馏时间真实一致；无需专门配置水龙头和冷水机，可在实验室内自由摆放，节约宝贵的实验室空间，每年可以为实验室节约大量的水资源与水费用的支出。

参考：AOAC，“Official methods of analysis”, method 981.10

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